As abelhas-sem-ferrão mantêm interações com fungos filamentosos associados ao alimento larval, capazes de produzir metabólitos de interesse biotecnológico. Neste estudo, nove isolados provenientes de quatro espécies de abelhas foram identificados por sequenciamento ITS, revelando pertencimento aos gêneros Penicillium e Aspergillus, reconhecidos pela síntese de compostos fenólicos, alcaloides e policetídeos com ação antioxidante. Os sobrenadantes produzidos no 3º e 5º dias de fermentação foram avaliados pelos ensaios FRAP, DPPH e ORAC, evidenciando maior atividade antioxidante nos cultivos de cinco dias, com destaque para Fv05, Mq03, Mq05, Ms46c e Ta26, alguns superando os controles positivos. O fracionamento em porções proteica e metabólica indicou que a atividade se concentra majoritariamente na fração metabólica. O fracionamento líquido-líquido dos sobrenadantes mais promissores revelou que diferentes frações — especialmente diclorometano, acetato de etila, n-butanol e aquosa — mantêm elevada capacidade de sequestro de radicais livres, sugerindo a presença de múltiplas classes de antioxidantes. Os resultados demonstram que fungos associados ao alimento larval de abelhas-sem-ferrão constituem fontes relevantes de metabólitos antioxidantes, reforçando seu potencial para aplicações farmacêuticas e biotecnológicas.